以色列BI(Sartorius)MSC无血清培养基货号：05-200-1A 基础培养基，05-200/201Kit(05-200-1A+05-201-1U)(基础培养基+营养添加物)

规格：500ml/瓶，100ml/瓶(基础培养基);3ml/瓶，0.6ml/瓶(基础添加物)

实验前准备：

5.1培养基的准备

5.1.1冻存的MSC NutriStem® XF Supplement在室温或2-8℃解冻，避免反复冻融。

5.1.2配制：MSC NutriStem® XF Basal Medium(培养基)：MSC NutriStem® XF Supplement(添加物)：青链双抗=500ml：3ml：5ml，4℃保存，2周内使用。

注1：双抗非必须，建议原代(P0)时使用。

注2：培养基含L-Glutamine，贮藏时避免长期照光。

5.2包被培养皿

或跳过此步骤，直接加2%血小板裂解物，促进MSC细胞贴壁与生长。

如果使用05-752-1H，参考如下步骤：

5.2.1使用DPBS溶液(BI, Cat# 02-023-1A)，将MSC贴壁试剂稀释100倍(1:100)。

5.2.2参照表3，加入适量的1X MSC贴壁试剂涂层培养皿或板。

表3 涂层过程中贴壁试剂建议使用量(05-752-1)

培养器皿表面积cm2/孔或瓶1X MSC贴壁试剂使用体积

96孔板0.340.05~0.1 ml

24孔板1.90.2~0.4 ml

12孔板3.90.4~0.8 ml

6孔板/ 35 cm培养皿9.61~2 ml

T25瓶/ 60 cm培养皿252.5~5 ml

T75瓶757.5~15 ml

注1：涂层的培养皿需在无菌条件下2℃-8℃储存，需在一周内使用。(标示红色为原厂建议使用量，经过实验测试后可减半使用)

注2：包被期间， 注意包被液不可以干掉!

5.2.3轻轻摇动培养皿，确认贴壁试剂均匀分布在培养皿表面后，用封口膜包裹涂层的培养皿。

5.2.4在2-8℃孵育过夜;或者在CO2培养箱，37℃，至少孵育30分钟。

5.2.5接种前, 吸除贴壁试剂，再用DPBS轻轻冲洗培养皿，即可接种细胞。

如果使用05-760-1-15，参考如下步骤：

5.2.1使用生理盐水，将NutriCoat™ 促贴壁试剂稀释500倍(1:500)。

5.2.2参照表4，加入适量的1X NutriCoat™ 促贴壁试剂涂层培养皿或板。

以色列BI(Sartorius)MSC无血清培养基产品链接：

http://www.haozebiotec.com/ParentList-2404250.html

https://www.chem17.com/st396886/list_2404250.html